固相萃取柱的正確操作使用指南
點擊次數：49 更新時間：2026-03-05
固相萃取柱是環境、食品、制藥及臨床檢測中用于樣品凈化、富集與基質去除的核心前處理工具，通過吸附劑選擇性保留目標物，顯著提升后續色譜或質譜分析的準確性與靈敏度。若操作不當，易因活化不充分、上樣超載、洗脫不當或交叉污染，導致回收率偏低、重現性差甚至假陽性結果。
固相萃取柱應嚴格遵循活化到位、上樣精準、洗脫高效、防污到位四大原則，確保萃得凈、取得準、測得真。
一、使用前準備
選擇合適填料與規格：
C18適用于非極性化合物（如農藥、多環芳烴）；
SAX/SCX用于離子型物質（如生物堿、有機酸）；
柱容量（如500mg/6mL）需匹配樣品濃度，避免過載；
溶劑兼容性確認：
確保樣品溶劑與活化/洗脫溶劑互溶，防止填料干裂或通道形成。
二、規范操作四步法
1、活化：
先用3–5mL強洗脫溶劑（如甲醇）潤濕填料，再用3–5mL弱溶劑（如水或緩沖液）平衡，使吸附劑處于適宜吸附狀態；
2、上樣：
樣品以慢速（1–2mL/min）流過柱床，避免溝流；高鹽或高脂樣品需離心/過濾預處理；
3、淋洗：
用中等強度溶劑（如5%甲醇水）去除雜質，切勿洗脫目標物；
4、洗脫：
用小體積強溶劑（如純甲醇、乙腈）分2–3次洗脫，每次浸泡30秒后重力滴落，禁止抽干柱床（尤其反相柱），以防目標物不可逆吸附。
三、關鍵細節控制
全程保持填料濕潤：干柱會導致回收率驟降；
使用正壓裝置時，控制流速均勻；
高通量實驗建議使用96孔板式SPE，但需校準每孔流速一致性。
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